CY2-Sodium Taurocholate,CY2标记牛磺胆酸钠,CY2-Cholic Acid,CY2标记胆酸
CY2-Sodium Taurocholate(CY2-TC Na,CY2标记牛磺胆酸钠)是一种将绿色荧光染料CY2共价标记于牛磺胆酸钠(Sodium Taurocholate, Na-TC)的化合物。牛磺胆酸钠是胆酸(Cholic Acid, CA)与牛磺酸(Taurine)结合后的钠盐形式,其化学式为C26H44NNaO7S,分子量约为537 g/mol。
牛磺胆酸钠分子具有典型甾体四环骨架(A、B、C、D环)以及C3、C7、C12羟基,C24位置通过酰胺键与牛磺酸连接,并形成磺酸钠盐,赋予分子两性结构。甾体骨架疏水,而磺酸钠端带有强亲水性和负电荷,使分子在水溶液中表现出良好的溶解性和表面活性。
CY2是一种绿色荧光染料,激发波长约为490 nm,发射波长约510–520 nm,具有高量子产率、良好光稳定性和水溶性。通过CY2标记牛磺胆酸钠,可获得兼具胆汁酸活性和荧光可追踪功能的分子,用于分子追踪、胆汁酸受体研究及递送系统分析。
在CY2-TC Na中,通常选择牛磺酸末端氨基与CY2的NHS酯或异氰酸酯活性基团形成稳定的酰胺键。该修饰保持甾体骨架和磺酸钠端的两性结构,使分子在生理条件下保持水溶性、稳定性及功能性。
二、化学结构特点
甾体骨架保留
CY2-TC Na保留胆酸的四环骨架,这是与胆汁酸受体结合的核心结构。四环结构的刚性提供空间构型,使分子在受体结合或脂质膜嵌入时保持生物活性。
两性结构
磺酸钠端带负电荷和亲水性,而甾体骨架疏水,形成典型两性分子结构。CY2结合后仍保留此特性,使分子在水性环境和脂质体系中分散性良好,减少非特异性沉淀。
氨基功能化
CY2通过NHS酯或异氰酸基与牛磺酸末端氨基反应,形成稳定酰胺键。这种功能化方法保持分子活性,同时引入可追踪的荧光信号。
荧光特性
CY2标记使牛磺胆酸钠获得绿色荧光,激发/发射波长约490/510–520 nm,量子产率高,光稳定性强,适用于细胞成像、流式细胞分析及分子追踪实验。
水溶性与分散性
磺酸钠盐增强分子水溶性,结合CY2后仍可在水性缓冲液、培养液及体内体系中保持良好分散性,为实验操作提供便利。
共价连接稳定性
通过酰胺键固定CY2,保证标记物在水溶液、细胞培养体系及体内条件下稳定,降低荧光信号衰减和非特异性脱落风险。
三、主要应用
胆汁酸受体研究
CY2-TC Na保留甾体骨架和磺酸钠端两性结构,能够模拟天然牛磺胆酸钠与胆汁酸受体(如FXR、TGR5)结合。荧光信号可用于受体结合动力学研究、受体分布分析及活性筛选实验,帮助理解胆汁酸介导的信号通路。
细胞膜和胞内追踪
分子两性结构使其能够与脂质膜嵌入,同时保持水溶性。CY2-TC Na可用于共聚焦显微镜或流式细胞仪实验,观察胆汁酸在细胞膜、胞质及胞器(如内质网、溶酶体)中的分布及动态转运。
药物递送系统评估
CY2-TC Na可作为分子示踪剂,用于脂质体、纳米微粒或聚合物载体的递送效率和靶向性研究。荧光信号可监控载体装载、释放动力学及靶向组织或细胞内分布,为递送机制优化提供直观数据。
体内成像与分布研究
绿色荧光信号可在小动物实验中追踪牛磺胆酸钠分布,评估胆汁酸在血液、肝脏、肠道及其他组织的摄取情况,为药代动力学研究提供支持。
多通道荧光实验兼容性
CY2标记可与其他荧光染料(如CY3、CY5、Alexa Fluor系列)组合使用,实现多通道共聚焦成像,支持复杂分子相互作用研究。
表面活性剂及膜动力学研究
牛磺胆酸钠的表面活性结构使CY2-TC Na可用于研究脂质膜动力学、膜蛋白相互作用及脂质体自组装行为,为生物膜研究提供便利。
四、实验操作注意事项
避光操作,保护CY2荧光团;
储存于低温(-20°C)条件,避免冻融次数过多;
在缓冲体系中保持中性或弱碱性pH,保护分子结构和荧光强度;
可与其他荧光标记组合使用,支持多通道成像实验。
五、总结
CY2-Sodium Taurocholate(CY2-牛磺胆酸钠)是一种兼具牛磺胆酸钠生物活性和CY2绿色荧光可视化功能的标记化合物。其化学特性包括甾体骨架保留、两性结构、氨基功能化、共价连接稳定、荧光强且光稳定及良好水溶性。主要应用涵盖胆汁酸受体研究、细胞膜和胞内追踪、药物递送系统评估、体内分布研究、多通道荧光实验以及膜动力学分析,为胆汁酸及相关分子研究提供高效可视化工具。