一、基础信息
- 中文名称:N 端生物素修饰人 / 大鼠同源神经肽 Y
- 英文全称:Biotinyl-Neuropeptide Y (human, rat)
- 三字母序列:Biotin-Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Ile-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂
- 单字母序列:Bio-YPSKPDNPGEDAPAEDMARYYSALRHYINLITRQRY-NH₂
- 氨基酸总数:36 aa
- 分子式:C189H285N55O57S
- 分子量:4271.75
- 修饰说明
- N 端修饰:Biotin(简写 Bio,生物素酰基);
- C 端酰胺化 -NH₂,封闭羧基末端;
- 无二硫键、环化、焦谷氨酸、乙酰、侧链定点修饰;
- 该序列人、大鼠 NPY 成熟肽完全保守通用。
- 结构式:
二、理化性质
1.紫外定量:含 Met、多组 Tyr,280 nm 紫外吸收强,可直接紫外分光光度法定量。
2.稳定性要点
- 含 Met,极易氧化,溶解、分装全程冰浴、减少空气暴露;长期冻干粉分装充氮气隔氧保存;
- Tyr 为强光敏残基,配液、储存全程避光;
- 序列富含 Pro 形成多处脯氨酸刚性转角;N 端 Bio、C 端酰胺两端封闭,显著抵御氨基肽酶、羧肽酶;长链多肽易被内肽酶降解,工作液建议现配现用。
3.酸碱特性
酸性残基:Asp、Glu;碱性残基:Lys、Arg、His;整体呈弱酸性;适配 pH 6.0–7.4 PBS、神经元 / 肠内分泌细胞培养基、人 / 大鼠血浆缓冲液。
4.溶解性
Ser、Thr、Asn、Gln 亲水残基搭配大量带电酸碱氨基酸,水溶性优异,中性缓冲液常温完全溶解。
5.空间构象
中段多 Pro 柔性弯折,C 端形成保守两亲 α 螺旋;C 端 Tyr-NH₂是 Y1/Y2/Y4/Y5 受体核心识别结构;N 端生物素远离受体结合口袋,不影响受体结合亲和力。
三、来源背景
神经肽 Y(NPY)是中枢、外周广泛表达的多功能神经内分泌肽,人、大鼠成熟活性序列完全一致;N 端偶联生物素作为通用亲和探针,人源、啮齿类细胞 / 组织实验均可使用。
四、生物学功能
- 广谱激活 Y 家族受体:Y1、Y2、Y4、Y5,强效促进食欲、调控能量代谢、脂肪堆积;
- 中枢:调节焦虑、应激、镇痛、睡眠、下丘脑内分泌;
- 外周:收缩血管、调节胃肠蠕动、抑制胰岛素分泌、调控交感神经活性;
- 生物素标签可特异性结合链霉亲和素,用于 Pull-down 捕获膜受体及互作蛋白、荧光 / 酶标示踪受体分布与内吞。
五、科研应用
- 人 / 大鼠原代细胞 Pull-down,富集 Y 受体及下游结合蛋白;
- Y 受体激动剂、拮抗剂体外竞争性结合筛选实验;
- 肥胖、食欲、应激焦虑、心血管、神经痛体外细胞模型;
- 人 / 啮齿类 NPY 通路对比研究;
- 免疫荧光、化学发光示踪神经肽受体组织分布。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间降低 Met 氧化;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3–5 天。