重组小鼠血管内皮生长因子 165(Mouse VEGF165 Protein)属于 VEGF‑A 家族重要亚型,成熟单体由 165 个氨基酸组成,预测分子量 19.3 kDa,大肠杆菌无标签表达。蛋白依靠二硫键组装成同源二聚体发挥完整生物学活性,具备完整肝素结合结构域,既可以游离于液相,也能够结合胞外基质中的糖胺聚糖,模拟小鼠内源 VEGF 储存与释放模式,特异性识别小鼠来源 VEGFR‑1、VEGFR‑2 受体,调控内皮细胞增殖、迁移以及管状结构组装,是小鼠原代内皮、主动脉环外植、类器官等体外模型的核心工具因子。尽管人和小鼠 VEGF 存在一定交叉活性,但受体亲和力存在差异,开展小鼠细胞正式科研优先选用小鼠源 VEGF165。Cykine 赛因生物这款无标签小鼠 VEGF165 蛋白 SDS‑PAGE 纯度>98%,内毒素<0.1 EU/μg,采用 HUVEC‑SV40 细胞增殖实验完成活性标定,适配多样化小鼠体外基础科研。
一、重组小鼠 VEGF165 分子与信号调控特点
小鼠 VEGF165 必须形成同源二聚体,诱导细胞膜 VEGFR 受体二聚化自磷酸化,激活下游 ERK、PI3K‑Akt 信号通路。ERK 通路驱动内皮细胞周期运转,介导细胞增殖;PI3K‑Akt 通路提升细胞存活能力,降低细胞凋亡。C 端肝素结合结构域是该亚型关键特征,可与肝素、基质硫酸乙酰肝素相互结合,在三维基质环境中形成局部信号库,该特性和 VEGF121 自由扩散模式形成鲜明对比。 本产品 Tag‑free 无标签设计,避免外源序列干扰二聚体组装和受体识别;ED₅₀为 0.30 ng/mL,比活性>3.33×10⁶ IU/mg;严苛的超低内毒素质控,适配小鼠原代内皮等高敏感细胞体系。需要注意,人源 VEGF165 可以对小鼠细胞产生部分刺激效果,但应答波动大,仅适合预实验摸索,不建议用于正式机制解析课题。
二、重组小鼠 VEGF165 核心体外科研应用场景
第一,小鼠原代内皮细胞体外功能研究。用于小鼠主动脉、肺组织分离得到的原代内皮细胞增殖、划痕迁移实验,探究小鼠内皮细胞运动、存活调控规律。肝素结合结构域可以模拟生理条件下基质锚定配体行为,更贴近小鼠内源信号环境。 第二,小鼠主动脉环外植与三维小管形成模型。可用于小鼠主动脉环出芽培养,以及基质胶小管形成实验,研究血管出芽、管状网络组装的调控规律,是发育血管生物学常用体外模型。 第三,小鼠多能干细胞向内皮谱系诱导。在小鼠 iPSC、ESC 分化体系中,作为诱导因子推动内皮谱系细胞生成,用于解析小鼠早期血管谱系发育调控网络。 第四,VEGF 受体信号通路科研参照工具。作为 WB 磷酸化检测的阳性刺激对照,评价小鼠细胞 VEGFR 通路中和试剂、候选小分子物质的体外功能效果。
三、小鼠体系实验关键提示
小鼠 VEGF165 生物学效应具备剂量依赖性;因为可以被基质肝素类成分捕获,二维培养与三维基质包裹体系的最优工作浓度差异较大,不能直接照搬人 VEGF 文献参数,正式实验务必设置浓度梯度预实验。同源二聚体对反复冻融、剧烈震荡敏感,多次冻融会造成二聚体解离,受体结合活性下降。低浓度操作条件,建议使用低吸附耗材,减少蛋白管壁吸附损耗。
重组小鼠 VEGF165 依托基质结合的分子特性,可以更好复刻小鼠内源配体生理行为,是小鼠模式生物血管发育、内皮细胞生物学方向不可或缺的科研工具。Cykine 赛因生物严格落实纯度、超低内毒素、细胞增殖活性多重质控,助力小鼠各类血管相关体外基础科研工作。