news 2026/10/14 18:36:37

硬核干货:睡眠剥夺小鼠模型怎么做?改良多平台水环境法全流程拆解(附评估方案)

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张小明

前端开发工程师

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硬核干货:睡眠剥夺小鼠模型怎么做?改良多平台水环境法全流程拆解(附评估方案)

DSI717Mu01睡眠剥夺(SD)小鼠模型

一.简介:

睡眠剥夺(Sleep Deprivation, SD)指睡眠时间缩减或睡眠结构发生紊乱,是解析睡眠缺失危害的经典动物病理模型,广泛用于睡眠不足介导的认知减退、情绪失调、神经炎症、突触可塑性损伤等方向研究。

本模型采用改良多平台水环境法实现选择性 REM(快速眼动)睡眠剥夺:小鼠进入 REM 睡眠时骨骼肌肌张力消失,头部触碰水面即被惊醒,以此特异性剥夺 REM 睡眠,模拟临床睡眠结构紊乱相关病理状态。

  • 材料:

1.货号:DSI7174Mu01

2.实验动物:SPF级Balbc小鼠,雄性,周龄为8w~10w,体重为25g~27g。

三.模型制作方法步骤:

云克隆采用改良多平台水环境法建立小鼠睡眠剥夺(sleep deprivation, SD)模型。实验造模装置为树脂玻璃水箱,箱内放置若干直径 2.5~3.0 cm 圆柱形平台,平台顶端距离水面 0.5~1 cm;箱内注水,水温恒定维持在 30±1 ℃。水箱上方放置网格网架,小鼠置于平台上,可自由获取食物与饮水。当小鼠进入 REM 睡眠,肌张力下降,头部触水即被唤醒,实现 REM 睡眠剥夺。

造模期间每日更换水箱内水体,保持水质清洁,观察小鼠状态,防止溺水。

四.模型评估:

1.行为学评估

学习记忆:采用 Morris 水迷宫 (MWM)、新物体识别 (NOR) 评价睡眠剥夺造成的认知损伤。注意长期水环境暴露可能干扰水迷宫基线水平,可搭配 Y 迷宫、Lashley III 迷宫进行补充验证。

焦虑/抑郁:旷场实验、悬尾实验检测动物焦虑、抑郁表型;现有文献表明,SD 诱发的焦虑行为和 IL6 介导的星形胶质细胞神经元交互作用密切相关。

  1. 分子与组织学评估

取海马、前额叶皮层组织,Western‑blot 检测 GFAP、神经炎症因子蛋白表达;免疫荧光观察 GFAP 阳性星形胶质细胞数量、形态改变,评价星形胶质细胞活化情况;检测血清皮质酮水平反映机体应激状态。

  1. 电生理评估(可选)

脑电图(EEG)联合肌电图(EMG)记录为模型验证金标准,定量分析 REM、NREM 及觉醒时间,确认 REM 睡眠剥夺效果;也可检测海马 LTP 评估突触可塑性变化。

图一:小鼠脑组织GFAP免疫组化染色图(上:对照组;下:模型组)

五.广泛的应用场景

1.认知功能障碍机制研究:探究SD如何通过氧化应激、神经炎症、突触蛋白(如PSD-95、SYN-1)下调等途径损害学习记忆。

2.情绪障碍研究:研究SD诱导的焦虑/抑郁样行为的神经环路机制(如PAG-ACC通路)及神经免疫调控。

3.神经退行性疾病交互研究:SD可作为加重因素,用于研究其与阿尔茨海默病病理(如Aβ沉积、tau磷酸化、铁死亡)的协同作用。

4.药物筛选与干预评估:评价潜在神经保护剂(如依达拉奉、染料木黄酮、大豆异黄酮、褪黑素等)对SD相关损伤的缓解作用。

5.肠道微生物-脑轴研究:探索SD导致的肠道菌群紊乱与中枢炎症、行为异常之间的关联。

六.结语

睡眠剥夺小鼠模型是打通睡眠生理学、神经免疫学与动物行为学研究的关键工具。云克隆依托标准化造模流程、精细化质控体系与专业技术团队,可实现模型稳定构建、表型精准评价与数据高度可靠,既能有效呈现 REM 睡眠剥夺核心特征,又能最大程度降低应激干扰,为睡眠研究、神经炎症、认知损伤及药物筛选提供高质量、可重复的动物模型支撑。未来,云克隆将持续优化模型构建方案,为全球科研工作者提供更专业、更高效、更贴近临床病理的模型服务与科研解决方案。

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